胰腺癌细胞CAR受体表达与5型腺病毒转导效率的关系

本研究通过体外、体内实验探讨了不同生物特性的胰腺癌细胞系细胞表面柯萨奇腺病毒受体(CAR)表达与Ad-GFP转导效率的关系.结果发现,不同细胞的CAR表达水平不同,细胞CAR表达水平与Ad-GFP转导效率明显呈正相关.因此,胰腺癌患者治疗前检测组织CAR表达水平有助于规范腺病毒载体的基因治疗药物的个体化使用,有利于提高疗效,减少病毒的副作用.     

右旋柠烯对幼鼠颞叶癫痫海马星形胶质细胞的影响

探讨右旋柠烯（D-L）对癫痫幼鼠海马星形胶质细胞胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的影响。利用尼氏染色及免疫组化技术观察匹罗卡品致癫痫的幼鼠经药物（左乙拉西坦、丙戊酸钠、D-L）治疗后星形胶质细胞形态学变化和GFAP的表达。尼氏染色显示药物治疗后幼鼠海马胶质神经元脱失较未治疗的幼鼠明显减轻;海马GFAP免疫阳性细胞数在药物治疗后的幼鼠较未治疗幼鼠明显减少（P〈O．05）。幼鼠癫痫发作可能与海马星形胶质细胞增生有关,D-L对发育期大鼠颞叶癫痫星形胶质细胞的增生及GFAP的表达似有抑制作用,推测D-L可能具有抗癫痫作用。     

启动子区甲基化导致ZNF331在结直肠癌中表达缺失

通过分析锌指蛋白331 (ZNF331)在结直肠癌中的甲基化及表达情况,探讨ZNF331基因的甲基化与结直肠癌的关系,为结直肠癌的早期诊断和治疗提供新的靶点.采用甲基化特异性PCR(MSP)检测7株结直肠癌细胞系和66例结直肠癌组织标本中ZNF331基因启动子区的甲基化情况.结果7株结直肠癌细胞系中LOVO、RKO、DLD1和HCT116启动子区完全甲基化,SW620和HT29呈部分甲基化,SW480为非甲基化.LOVO、RKO、DLD1、HCT116细胞系中ZNF331mRNA不表达,经5-Aza处理后恢复表达.在SW480、SW620、HT29细胞系中,5-Aza处理前后均表达,处理后表达量增加.在66例结直肠癌组织中,ZNF331启动子区甲基化率为72.7％(48/66),而正常结直肠组织中无甲基化(0/7).     

不同浓度顺铂对肺癌A549细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax表达的影响

通过观察不同浓度顺铂作用下肺腺癌A549细胞凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达及表达比例的变化,探讨Bcl-2和Bax与铂类药物敏感性的关系。研究采用CCK8检测顺铂作用下A549细胞的半数抑制浓度IC50值,确定顺铂用药范围。实时定量PCR、Western blotting法检测不同浓度顺铂作用下肺腺癌A549细胞中抗凋亡因子Bcl-2、促凋亡因子Bax的mRNA及蛋白表达情况,以及两者表达比例的变化。结果随着顺铂浓度的不断升高,Bcl-2及Bax的表达均增加,而抗凋亡因子Bcl-2升高的趋势更为明显,Bcl-2/Bax表达比例增加。提示随着顺铂浓度的提高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达比例逐渐增加,可能会部分降低铂类促肿瘤细胞凋亡的作用,从而参与了铂类的耐药过程。     

赖氨酰氧化酶在动脉粥样硬化中的作用

赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)是一种铜依赖性氨基氧化酶,在多个组织器官中均有表达,能参与催化细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中胶原和弹性纤维的赖氨酸残基交联,以维持细胞外基质的结构和功能正常.新近研究发现LOX与动脉粥样硬化亦有紧密关系.本文就LOX在动脉粥样硬化发生、发展过程中的联系作一综述.     

赖氨酰氧化酶在动脉粥样硬化中的作用

赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)是一种铜依赖性氨基氧化酶,在多个组织器官中均有表达,能参与催化细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中胶原和弹性纤维的赖氨酸残基交联,以维持细胞外基质的结构和功能正常。新近研究发现LOX与动脉粥样硬化亦有紧密关系。本文就LOX在动脉粥样硬化发生、发展过程中的联系作一综述。     

慢性应激诱导的抑郁小鼠神经肽Y的表达及抗抑郁药的作用

神经肽Y是一个多肽,广泛分布于周围和中枢神经系统,以下丘脑的浓度为高,参与机体神经内分泌、情绪、行为等的调节。 为探讨慢性应激诱导的抑郁模型小鼠脑内神经肽Y (NPY)的表达,以及抗抑郁药的作用机理,采用慢性应激与孤养方法,建立抑郁小鼠模型。用旷场行为 (Open-Field)法,观察模型组与正常对照组行为学改变方面的差异。将36 只抑郁模型小鼠随机分成盐酸氟西汀组、盐酸阿米替林组、生理盐水治疗组,并与12 只正常对照组比较。用半定量逆转录－聚合酶联反应(RT－PCR) 法、细胞酶联免疫法及蛋白免疫印迹(Western－blot) 法、免疫组织化学法,比较四组小鼠下丘脑NPY 的表达。结果表明：(1)与正常组比较,抑郁模型组小鼠活动总路程与活动次数减少（p< 0.01）,体重增速下降（p< 0.05）。（2）与正常组比较,抑郁模型组小鼠下丘脑NPY 的mRNA 表达下降（p< 0.01）;经盐酸氟西汀、盐酸阿米替林治疗后,下丘脑NPY 的mRNA 及蛋白表达增高,与生理盐水组比较差异显著（p< 0.01）。(3) 与正常组比较,生理盐水治疗组胞膜和胞质呈棕黄色染色,显示出明显的免疫组化阳性反应;经盐酸氟西汀、盐酸阿米替林治疗后,胞膜和胞质的着色与背景色接近,免疫组化呈弱阳性、阴性反应。提示抑郁模型组小鼠脑内NPY 表达水平有显著下降,使用抗抑郁药有利于提高脑内NPY 的mRNA 及蛋白表达,可能是此类药物产生抗抑郁效应的机制之一。     

杏仁核c-fos的表达与条件反射性免疫抑制

以糖精水为条件刺激（conditioned stimulus,,CS）,免疫抑制剂-环磷酰胺为非条件刺激 （(unconditioned stimulus,,UCS),在两次CS-UCS结合训练后,观测不同时程再次单独呈现条件刺激对条件反射性免疫抑制和味觉厌恶性行为反应的变化以及大鼠杏仁核各亚核团内c-fos蛋白表达的影响。结果表明,条件反射性免疫抑制作用在训练后第5天较强,第30天基本消失,而味觉厌恶性条件反射始终稳定保持到第30天。条件反射组大鼠杏仁中央核c-fos蛋白表达在第5天非常密集,而第30天明显减少,与细胞免疫功能改变在时程和趋势上具有一致性。通过c-fos蛋白表达时程差异比较,提示杏仁中央核可能既与条件性的味觉厌恶性行为建立有关,也是参与介导CS诱导的免疫抑制效应的重要核团。     

Slit2与MVD及食管癌生物学行为关系的研究

研究食管鳞状细胞癌组织中神经迁移蛋白Slit2的表达及其与微血管密度的关系,并探讨两者与食管鳞癌临床病理特征的关系.采用免疫组化SP法检测64例癌组织和36例癌旁组织中Slit2蛋白的表达水平及CD34标记的微血管密度(microvessel density,MVD).Slit2蛋白在食管鳞状细胞癌和癌旁组织中的表达阳性率分别为70.3%和16.7%.两者的表达差异有统计学意义(X2=26.53,P<0.01);食道鳞状细胞癌和癌旁组织中MVD计数分别为(44.07±17.44)/mm2,(25.26±7.91)/mm2,两者存在显著性差异(t=7.383,P<0.01);Slit2表达阳性的肿瘤组织MVD明显大于Slit2阴性表达的肿瘤组织[(49.30±15.78)/mm2对(34.44±17.06)/mm2,P<0.05)],Slit2蛋白的表达水平与肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移显著相关;MVD计数与浸润深度、TNM分期和淋巴结转移显著相关.肿瘤组织中Slit2蛋白的表达与MVD计数呈正相关(r=0.683,P<0.01).结论认为食管鳞状细胞癌组织中Slit2蛋白表达和MVD计数与其生物学行为密切相关,是通过Slit2基因介导肿瘤新生血管的形成实现的,Slit2是调节食管癌血管生成的重要因子.     

Leptin 研究新进展中的系统思维

肥胖基因 (ｏｂｅｓｅｇｅｎｅ ,ｏｂ基因 )的表达产物是一种脂肪组织源激素 ,被称为Ｌｅｐｔｉｎ(该词源于希腊文ｌｅｐｔｏｓ ,意为“瘦”) ,中文译名有“瘦素”、“消脂素”、“苗条蛋白”等。ｏｂ基因及Ｌｅｐｔｉｎ的发现 ,使人们对体脂贮备及能量平衡机制的认识取得突破性进展 ,揭开了肥胖代谢研究的新篇章。1　Ｌｅｐｔｉｎ选题中的系统思路195 3年Ｋｅｎｎｅｄｙ提出脂肪稳定学说 (Ｌｉｐｏｓｔａｓｉｓｔｈｅｏｒｙ) :脂肪组织能产生一种物质 ,通过作用于下丘脑的代谢控制中枢 ,影响机体能量的摄取和消耗 ,以调节体脂保持相对稳定…     

PCSK9抑制剂:他汀强有力的挑战者

他汀类药物是目前应用最广的降脂药物,是预防和治疗动脉粥样硬化性心血管疾病的基石,然而他汀类药物的局限性日益显露,研发针对脂类代谢不同靶点的新型降脂药物成为热点之一,随着前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)的发现,PCSK9抑制剂这类新型降脂药受到极大的关注,为降脂治疗提供了更多的选择,为很多无法耐受他汀类药物及他汀治疗效果不佳的患者带来福音。以下就他汀类药物的作用机制、副作用,PCSK9抑制剂的作用机制、优势、前景等进行综述。     

窄谱中波紫外线对银屑病皮损热休克蛋白27、60、90α、90β影响的研究

探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)局部照射治疗银屑病患者前后,对皮损组织HSP27、HSP60、HSP90α、HSP90β表达的影响。采用免疫组化法检测20例银屑病患者皮损区治疗前后及10例正常人皮肤中HSP27、HSP60、HSP90α、HSP90β的表达情况。发现在银屑病皮损中,HSP60、HSP90α、HSP90β表达明显升高,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);NB-UVB治疗后表达降低,与健康对照组比较,差异无统计学意义(P值均0.05)与治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05)。在银屑病皮损中,HSP27表达降低,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P0.05),NBUVB治疗后表达虽有所升高,但与健康对照组比较,差异仍有统计学意度(P0.05);与治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05)。热休克蛋白在银屑病的发病过程中具有重要作用,并且不同的热休克蛋白在银屑病的发生发展中发挥的作用不尽相同。NB-UVB可通过调控热休克蛋白的表达,对银屑病起到有效的治疗作用。     

单次低剂量放疗联合BTV- HbC3对小鼠前列腺癌细胞的杀伤效应

本文主要研究蓝舌病毒湖北株(BTV- HbC3)联合单次低剂量放疗对小鼠前列腺癌细胞(RM1 cell)杀伤作用,并探讨蓝舌病毒联合放疗能增强对小鼠前列腺癌细胞的杀伤效应.实验过程中首先采用Vero细胞扩增BTV- HbC3病毒,而后用其感染RM1细胞,24h后予以单次低剂量放疗后观察其细胞病变效应.并以CCK-8法研究放疗加病毒后致细胞病变率的特征.检测实验结果发现BTV加放疗组比单因素处理组出现更加明显的细胞病变效应,细胞内出现大量病毒颗粒,细胞肿胀裂解.CCK-8法检测联合因素组细胞存活率明显降低.从而我们可以得出以下结论:BTV联合单次低剂量放疗能更加有效地杀死小鼠前列腺癌细胞,引起其编程性程序死亡.     

尼可地尔与前列地尔预处理对大鼠心肌缺血再灌注的影响

研究尼可地尔、前列地尔及两药物联合应用预处理对心肌缺血再灌注中的影响,探究其作用机制.采用Tunel法检测心肌组织的凋亡情况,免疫组化法检测Bax、Bcl-2和caspase-3的蛋白表达情况.结果显示尼可地尔和前列地尔半剂量联合组细胞凋亡数、Bax和caspase-3的表达量均明显低于其他给药组(P＜0.05),Bcl-2的表达量明显高于其他给药组(P＜0.05);尼可地尔和前列地尔单给药组细胞凋亡、Bax、caspase-3表达均有降低,Bcl-2表达升高,但效果不及联合用药半剂量组.以此得出结论尼可地尔和前列地尔的联合用药效果较好,可加强对心肌的保护作用.     

长期双酚A暴露对成年小鼠恐惧记忆的影响

双酚A (bisphenol, BPA)是一种广泛应用于塑料制品的环境内分泌干扰物, 具有弱雌激素和抗雄激素活性, 与雌激素受体有一定的亲和力。本实验探讨长期BPA暴露对成年小鼠恐惧记忆的影响及其神经机制。将9周龄雄性小鼠暴露于BPA (0.4、4、40 mg/kg/d) 90 d, 建立小鼠亚慢性BPA暴露模型后, 进行场景性条件恐惧训练, 然后分别在电击后1 hr及24 hr检测小鼠的僵立时间, 同时在电击前、电击后1 hr及24 hr检测海马相关蛋白表达变化。结果表明, BPA (4、40 mg/kg/d)暴露延长小鼠场景性条件恐惧训练后1 hr及24 hr的僵立时间。Western blot蛋白检测结果显示, 行为训练前, BPA降低了小鼠NMDA受体NR1亚基表达水平, 上调组蛋白去乙酰化酶2表达。行为训练后1 hr及24 hr, BPA促进海马NMDA受体亚基NR1和组蛋白H3乙酰化表达, 抑制组蛋白去乙酰化酶2表达, 同时促进ERK1/2磷酸化水平。以上结果表明, 长期BPA暴露提高成年小鼠恐惧记忆获得的同时延长恐惧记忆的保持; 该作用可能通过激活海马的ERK1/2通路而改变核内组蛋白乙酰化和NMDA受体水平进行。     

胰岛素样生长因子结合蛋白3mRNA在肾癌中的表达

为探讨胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)mRNA在肾癌(RCC)中的表达,采用半定量RT-PCR方法进行检测,检测56例RCC组织标本及56例癌旁组织标本中IGFBP-3的表达.结果显示RCC与癌旁组织之间IGFBP-3表达差异有显著性(P＜0.05),IGFBP-3在透明细胞癌的强阳性表达,高于其他病理类型(P均＜0.05),并与病理分级相关.因此,IGFBP-3在RCC组织中的表达具有显著性,其在肾透明细胞癌中的强阳性表达具有特异性.     

乳头状甲状腺癌VDR及OPN的表达与钙化的关系及临床意义

通过检测甲状腺良恶性病灶中维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)及骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)的表达情况,探讨其在甲状腺癌钙化及发生、发展中的作用.实验组选取钙化和非钙化各30例的乳头状甲状腺癌病例共60例,对照组用良性结节性甲状腺肿15例和甲状腺腺瘤15例,通过免疫组织化学法检测良恶性甲状腺组织中VDR及OPN的表达情况,分析其在良恶性之间、乳头状甲状腺癌钙化与非钙化之间以及其他临床病理因素之间的差异及相关性.结果VDR与OPN在乳头状甲状腺癌中的表达明显高于良性病灶(P＜0.01);VDR与OPN的表达与患者性别、年龄及淋巴结转移之间无统计学差异,但与乳头状甲状腺癌是否钙化及大小之间有统计学差异,并存在正相关性.肿块钙化或大于1cm的乳头状甲状腺癌VDR和OPN的表达明显增高,VDR和OPN表达亦为正相关(P＜0.05).因此,VDR和OPN蛋白增强可能参与了乳头状甲状腺癌钙他的形成以及肿瘤发生、发展的过程.     

丰富环境对脑缺血大鼠突触界面结构修饰和PSD-95基因表达的影响

探讨丰富环境干预对局部脑缺血大鼠突触界面结构修饰和突触后致密物-95 (postsynaptic density-95,PSD-95 ) mRNA表达的影响。栓塞健康雄性Sprague-Dawley大鼠的右侧大脑中动脉,建立脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型后,分为丰富环境缺血组(IE)、标准环境缺血组(IS),同时分别设丰富环境假手术组(SE)、标准环境假手术组(SS)。以Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,应用透射电镜、图像分析和细胞形态计量学技术,观察海马CA1区和额叶皮层突触界面结构变化,采用RT-PCR检测突触后脚手架蛋白PSD-95 mRNA的表达。结果表明：丰富环境干预能有效改善脑缺血导致的空间学习记忆能力下降,并对正常大鼠的空间学习记忆能力也有改善作用。同时,丰富环境干预能抑制局部脑缺血导致的突触数密度减少,该作用对额叶皮层特别明显;丰富环境干预不同程度地逆转脑缺血造成的突触界面参数变化,特别使突触间隙宽度显著减小、PSD厚度明显增加;并有效抑制因脑缺血诱导的PSD-95 mRNA表达下调。以上结果提示,丰富环境改善脑缺血大鼠的空间学习记忆能力可能与其促进缺血区边缘组织突触界面结构修饰,提高PSD-95 mRNA表达有关     

剥夺左眼和单眼学习与雏鸡脑内Jun样蛋白表达的相关性研究

利用免疫组化技术,观察并比较剥夺一侧视觉及单眼一次性味觉厌恶回避学习后Ｊｕｎ样蛋白在雏鸡ＨＶ和ＬＰＯ的表达,结果表明正常雏鸡ＨＶ、ＬＰＯＪｕｎ表达几乎没有,剥夺左眼和单眼视觉学习后均可使Ｊｕｎ样蛋白增高。根据阳性神经元记数结果表明：１．视剥夺２．５、４、２４小时后可使Ｊｕｎ样蛋白的表达逐渐增高,而且它们之间的差异显著;２．剥夺左眼２小时和２４小时后训练,并分别于１０分钟、７０分钟记忆保持测验后可看到Ｊｕｎ样蛋白表达继续增多;３。无论单纯视剥夺组还是单眼视觉学习组,各组ＬＰＯＪｕｎ样蛋白的表达均明显高于ＨＶ的Ｊｕｎ样蛋白表达,它们之间差异显著。     

PAX8蛋白在脑胶质瘤患者组织中表达水平及其与临床病理特征分析

PAX8蛋白在脑胶质瘤患者组织中表达水平及其与临床病理特征分析。选取大连大学附属新华医院确诊的脑胶质瘤患者98例,根据2016年世界卫生组织(WHO)神经系统肿瘤分级标准,分为I级12例,Ⅱ级18例,Ⅲ级21例,Ⅳ级47例,使用酶联免疫吸附法、蛋白印迹法及免疫组化等方法测定所有脑胶质瘤患者PAX8蛋白表达。Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级患者PAX8蛋白表达水平高于Ⅰ级,且Ⅲ级患者PAX8蛋白表达水平高于Ⅱ级,Ⅳ级患者PAX8蛋白表达水平高于Ⅱ级、Ⅲ级,差异均有统计学意义;PAX8蛋白表达与年龄、病理学类型相关性不明显,差异无统计学意义;与病理学分级、瘤周水肿、浸润深度相关性明显,且病理学分期越高、瘤周水肿程度越高、浸润深度越深,PAX8蛋白阳性表达率越高,差异有统计学意义;PAX8阴性组总生存率及生存期均明显高于PAX8阳性组,差异有统计学意义。PAX8的表达水平与脑胶质瘤病理分级正相关,PAX8在脑胶质瘤的发生发展过程中起促进作用;PAX8低表达的脑胶质瘤患者能获得较好的预存率及生存期均明显高于PAX8阳性组。