雷公藤甲素抗肿瘤作用机制的研究进展

雷公藤甲素是在雷公藤中提取的一种主要的活性有效成分,具有抗炎、免疫抑制、抗肿瘤等多重作用。大量的体内外研究证实其对多种癌症具有良好的抗肿瘤活性,本文主要就雷公藤甲素通过雌激素受体、MAPK通路、热休克蛋白、p53基因的表达、WNT通路、核转录因子、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体等分子水平方面的抗肿瘤作用机制进行阐述。     

长期双酚A暴露对成年小鼠恐惧记忆的影响

双酚A (bisphenol, BPA)是一种广泛应用于塑料制品的环境内分泌干扰物, 具有弱雌激素和抗雄激素活性, 与雌激素受体有一定的亲和力。本实验探讨长期BPA暴露对成年小鼠恐惧记忆的影响及其神经机制。将9周龄雄性小鼠暴露于BPA (0.4、4、40 mg/kg/d) 90 d, 建立小鼠亚慢性BPA暴露模型后, 进行场景性条件恐惧训练, 然后分别在电击后1 hr及24 hr检测小鼠的僵立时间, 同时在电击前、电击后1 hr及24 hr检测海马相关蛋白表达变化。结果表明, BPA (4、40 mg/kg/d)暴露延长小鼠场景性条件恐惧训练后1 hr及24 hr的僵立时间。Western blot蛋白检测结果显示, 行为训练前, BPA降低了小鼠NMDA受体NR1亚基表达水平, 上调组蛋白去乙酰化酶2表达。行为训练后1 hr及24 hr, BPA促进海马NMDA受体亚基NR1和组蛋白H3乙酰化表达, 抑制组蛋白去乙酰化酶2表达, 同时促进ERK1/2磷酸化水平。以上结果表明, 长期BPA暴露提高成年小鼠恐惧记忆获得的同时延长恐惧记忆的保持; 该作用可能通过激活海马的ERK1/2通路而改变核内组蛋白乙酰化和NMDA受体水平进行。     

PTEN、p53和BAG-1在三阴乳腺癌中的表达及意义

为了研究PTEN、p53和BAG-1在三阴乳腺癌中的表达情况及临床病理意义,并讨论三者之间的关系.采用免疫组织化学SP法检测89例三阴乳腺癌中PTEN、p53、BAG-1的表达,其阳性表达率分别为44.9％、47.2％、73.0％,三者的表达均与患者的病理组织学分级、淋巴结转移情况有关（P＜0.05）.PTEN的表达与p53、BAG-1表达呈负相关;BAG-1与p53的表达呈正相关,提示三者在三阴乳腺癌中的表达存在一定关联性,临床上联合检测三者可能为TNBC预后评估、患者的个体化治疗提供一定的参考.     

PTEN、p53和BAG-1在三阴乳腺癌中的表达及意义

为了研究PTEN、p53和BAG-1在三阴乳腺癌中的表达情况及临床病理意义,并讨论三者之间的关系.采用免疫组织化学SP法检测89例三阴乳腺癌中PTEN、p53、BAG-1的表达,其阳性表达率分别为44.9％、47.2％、73.0％,三者的表达均与患者的病理组织学分级、淋巴结转移情况有关(P＜0.05).PTEN的表达与p53、BAG-1表达呈负相关;BAG-1与p53的表达呈正相关,提示三者在三阴乳腺癌中的表达存在一定关联性,临床上联合检测三者可能为TNBC预后评估、患者的个体化治疗提供一定的参考.     

急性脑梗塞患者CD_18、CD_54与CD_62p、CD_63表达变化的临床研究

为探讨粘附分子CD18、CD54和血小板CD62、CD63表达变化与急性脑梗塞（ACI）发病之间的关系,本文应用流式细胞仪（FCM）检测了52例ACI患者治疗前后CD18、CD54与CD62p、CD63两者的表达水平,并与30例正常人作对照。结果显示,脑梗塞组治疗前两者的表达水平均明显上调,与正常对照组比较均有显著差异...     

环境雌激素双酚A对成年小鼠学习记忆和突触结构的影响*

双酚A (bisphenol, BPA)是一种广泛存在的环境内分泌干扰物,它可与雌激素受体结合干扰内源性雌激素对中枢神经系统的调控作用。本研究通过将10周龄小鼠灌胃染毒BPA (0.4、4、40 mg/kg/day)3个月,研究长期BPA暴露对成年小鼠记忆行为和突触可塑性的影响。开场行为测试结果表明, BPA (0.4、4、40 mg/kg/day)增加雄性的站立次数和理毛频率, BPA (4 mg/kg/day)却显著减少雌鼠的站立次数。水迷宫和被动回避行为模型检测显示, BPA主要损伤雄鼠的空间学习记忆和被动回避记忆。通过制备海马CA1区超薄切片后,电镜观测发现, BPA (0.4、40 mg/kg/day)暴露降低雄鼠海马CA1区突触数密度,缩短雄鼠突触前活性带长度,减小雄鼠突触后致密体(PSD)厚度,增加雄鼠突触间隙宽度。进一步用Western blot方法检测突触前、后的标志性蛋白Synapsin I和PSD95以及兴奋性氨基酸NMDA受体NR1亚基和AMPA受体GluR1亚基蛋白的表达,发现BPA暴露致雄鼠Synapsin I、PSD95、NR1蛋白表达水平下调。而BPA对雌鼠的记忆行为、突触形态、突触蛋白和受体蛋白均没有明显作用。以上结果提示长期B PA暴露性别特异性地影响成年小鼠的活动性和探究行为,损伤雄鼠的学习记忆,这些作用可能通过下调突触蛋白和NMDA受体的表达而负性影响突触结构可塑性,最终影响雄鼠的学习记忆功能。     

增塑剂DEHP的神经和行为发育毒性

增塑剂邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-(2-ethylhexyl) phthalate,DEHP)是一种具有拟雌激素和抗雄激素活性的环境内分泌干扰物,人类和野生动物可通过不同途径终生暴露于DEHP.母体摄入的DEHP可通过胎盘和乳汁转入子代体内并进入脑组织.围生期DEHP暴露性别特异性地改变子代大鼠下丘脑视前区芳香酶活性而影响雌激素合成,并通过改变雌激素受体活性干扰雌激素对脑发育的调节作用.DEHP及其代谢产物可以影响神经细胞的增殖分化和突触形成,干扰性激素调控发育过程中的下丘脑氨基酸递质系统对促性腺激素释放激素分泌的刺激作用,影响中脑多巴胺递质系统发育而诱导自发性多动症.DEHP对脑发育的作用最终影响动物的早期行为、学习记忆和情感等行为发育.     

应激性抑郁样行为发生中海马5-羟色胺1A受体的作用及其对NMDA受体和AMPA受体的调节

为探讨慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)诱发抑郁样行为发生中海马5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine receptor 1A, 5-HT1AR)表达与作用, 及其对谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受体和α-氨基羟甲基异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5- methylisoxazole-4-propionic acid, AMPA)受体的影响。通过建立CUMS动物模型, 给应激抑郁模型大鼠海马微量注射5-HT1A受体激动剂、给正常大鼠海马微量注射5-HT1A受体拮抗剂, 测量大鼠体重变化率, 并采用糖水偏爱测试、旷场实验和悬尾实验等方法对大鼠进行行为学检测, 运用Western blot和ELISA方法检测大鼠海马组织中5-HT1AR和NMDAR和AMPAR的关键亚基的表达以及磷酸化水平。结果显示, 与对照组相比, CUMS组大鼠表现出抑郁样行为, 海马5-HT1AR、AMPA受体的GluR2/3亚基表达及磷酸化明显降低, NMDA受体的NR1和NR2B亚基表达及磷酸化显著增加; 正常大鼠海马微量注射5-HT1A受体拮抗剂WAY100635, 动物行为学表现及AMPA受体、NMDA受体表达及磷酸化水平均与CUMS组相同; 注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT能逆转应激诱导的上述改变。以上结果表明, CUMS诱发抑郁样行为与海马5-HT1AR表达下降, AMPAR表达量及磷酸化水平降低, NMDAR表达量及磷酸化水平升高有关。5-HT通过5-HT1AR产生抗抑郁作用。5-HT1AR激动剂抗抑郁作用与降低NMDAR表达量及磷酸化水平, 提高AMPAR表达量及磷酸化水平密切相关。     

p27和Cyclin E在子宫内膜腺癌中的表达及相关性分析

探讨p27和cyclinE蛋白表达在子宫内膜腺癌的发生、发展中的关系。采用免疫组织化学sP法,测定20例正常子宫内膜、10例不典型增生、40例内膜腺癌中p27、cyclin E蛋白的表达情况。p27蛋白在正常子宫内膜与内膜腺癌的阳性表达比较差异有显著性（P〈0．05）;cyclinE蛋白在正常子宫内膜与不典型增生及子宫内膜腺癌的表达相比较差异均有显著性（P〈0．05）。在子宫内膜腺癌中p27阳性表达率与cyclin E阳性表达率之间存在反向关系。     

p27和Cyclin E在子宫内膜腺癌中的表达及相关性分析

探讨p27和cyclinE蛋白表达在子宫内膜腺癌的发生、发展中的关系。采用免疫组织化学sP法，测定20例正常子宫内膜、10例不典型增生、40例内膜腺癌中p27、cyclin E蛋白的表达情况。p27蛋白在正常子宫内膜与内膜腺癌的阳性表达比较差异有显著性（P〈0．05）；cyclinE蛋白在正常子宫内膜与不典型增生及子宫内膜腺癌的表达相比较差异均有显著性（P〈0．05）。在子宫内膜腺癌中p27阳性表达率与cyclin E阳性表达率之间存在反向关系。     

鼻咽癌组织VEGF、TNF—α及其受体VEGFR1、P55的表达及意义

观察鼻咽癌黏膜上皮中血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）及受体血管生长因子1（VEGFR1）,肿瘤坏死生长因子受体蛋白55（P55）的表达情况,探讨其在鼻咽癌发病及进展中的意义。我们应用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌和60例正常鼻黏膜上皮组织VEGF、TNF—α及VEGFR1、P55表达情况,分析其在鼻咽癌组织中的表达变化及意义。结果显示鼻咽癌黏膜上皮的VEGF、TNF—α、VEGFR1、P55表达高于正常鼻黏膜上皮。因此VEGF、TNF—α及其受体VEGFR1、P55在鼻咽癌黏膜上皮中过度表达,可能参与鼻咽癌的发病及疾病进展,对于鼻咽癌的预防及治疗具有重要意义。     

鼻咽癌组织VEGF、TNF-α及其受体VEGFR1、P55的表达及意义

观察鼻咽癌黏膜上皮中血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及受体血管生长因子1(VEGFR1),肿瘤坏死生长因子受体蛋白55(P55)的表达情况,探讨其在鼻咽癌发病及进展中的意义.我们应用免疫组化SP法检测60例鼻咽癌和60例正常鼻黏膜上皮组织VEGF、TNF-α及VEGFR1、P55表达情况,分析其在鼻咽癌组织中的表达变化及意义.结果显示鼻咽癌黏膜上皮的VEGF、TNF-α、VEGFR1、P55表达高于正常鼻黏膜上皮.因此VEGF、TNF-α及其受体VEGFR1、P55在鼻咽癌黏膜上皮中过度表达,可能参与鼻咽癌的发病及疾病进展,对于鼻咽癌的预防及治疗具有重要意义.     

胰腺癌细胞CAR受体表达与5型腺病毒转导效率的关系

本研究通过体外、体内实验探讨了不同生物特性的胰腺癌细胞系细胞表面柯萨奇腺病毒受体(CAR)表达与Ad-GFP转导效率的关系.结果发现,不同细胞的CAR表达水平不同,细胞CAR表达水平与Ad-GFP转导效率明显呈正相关.因此,胰腺癌患者治疗前检测组织CAR表达水平有助于规范腺病毒载体的基因治疗药物的个体化使用,有利于提高疗效,减少病毒的副作用.     

APC及p63在人口腔鳞状细胞癌发生中的表达及病理意义

为了探讨抑癌基因APC及p63在口腔鳞状细胞癌中的蛋白表达水平和病理意义,实验收集46例人口腔鳞癌石蜡包埋组织,采用elivision染色法检测口腔正常黏膜上皮、上皮异常增生和口腔鳞癌组织中的APC及p63的表达变化,最后将各组份的免疫组化结果与各病例的临床病理学资料使用Kruskal- Wallis检验或Spearman相关性检验,进行统计学处理.结果显示APC蛋白胞浆表达水平与口腔鳞癌的分化呈正相关(P＜0.05),p63蛋白胞核表达水平与口腔鳞癌的分化呈负相关(P＜0.05).APC与其淋巴结有否转移无相关性,而p63与其淋巴结转移有否呈负相关(P＜0.05).因此,APC及p63的表达与口腔鳞癌的发生密切相关,而且与口腔鳞癌的分化程度有关,提示APC和p63可作为口腔鳞癌的发生和预后的检测指标.     

慢性应激性抑郁发生中大鼠眶额叶多巴胺D1受体对谷氨酸及其NMDA受体的调节

本文旨在探讨慢性应激性抑郁发生过程中眶额叶多巴胺D1受体对谷氨酸(glutamic acid, Glu)及其N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受体的NR2B亚基的影响。实验通过建立慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁模型, 结合眶额叶微量注射多巴胺D1受体激动剂SKF38393和多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390, 运用糖水偏爱测试、悬尾实验和敞箱实验等方法检测动物的行为表现, 采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)和蛋白质免疫印迹法(Western blot, WB)来检测眶额叶内谷氨酸、多巴胺含量及NR2B和多巴胺D1受体的表达。结果显示, 与对照组相比, CUMS组大鼠表现出明显的抑郁样行为变化, 且眶额叶多巴胺含量降低, 其D1型受体表达降低, 谷氨酸含量升高, 其NMDA受体的NR2B亚基也明显上调; 注射SKF38393后可明显改善应激引起的抑郁样行为, 且眶额叶谷氨酸含量显著下降, NMDA受体的NR2B亚基表达也有所降低; 正常大鼠注射多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390, 大鼠表现出和CUMS模型组相似的抑郁样行为, 且眶额叶谷氨酸含量升高, 其NMDA受体的NR2B亚基也明显上调。以上结果表明, 慢性不可预见性应激可能使眶额叶多巴胺释放减少, 从而使谷氨酸过量释放, NMDA受体过度激活, 导致抑郁发生。多巴胺抗抑郁作用是通过D1型受体抑制谷氨酸及其NMDA受体NR2B亚基表达来实现。     

CyclinD1、VEGF、Flt-1在肝细胞癌中的表达及临床意义

探讨肝细胞癌( Hepatocellular carcinoma,HCC)、胆管癌、肝硬化及正常肝组织中周期素D1 (CyclinD1)、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体(Flt-1)蛋白表达的意义及其与肝癌生物学行为关系.对52例符合要求的HCC组织、10例胆管癌组织、10例肝硬化组织及10例正常肝组织采用免疫组化S-P法检测CyclinD1、VEGF及Flt-1蛋白.CyclinD1、VEGF及Flt-1在HCC的强阳性表达率分别为55.8％、55.8％及67.3％,均显著高于胆管癌、肝硬化及正常肝组织(P＜0.001).CyclinD1及VEGF表达与肿瘤包膜完整、血管侵犯及肿瘤分化程度明显有关(P＜0.05);Flt -1与肿瘤分化程度明显有关(P＜0.05).CyclinD1与VEGF间、CyclinD1与Flt-1间及VEGF与Flt-1间的蛋白表达均呈正相关(R=0.445,P＜0.01、R=0.368,P＜0.01、R=0.332,P＜0.01).CyclinD1、VEGF及Flt-1蛋白的过表达可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强的侵袭力,与肝癌的发生、发展密切相关.     

PDGF-BB、Podoplanin在非小细胞肺癌中的表达与淋巴管生成的关系

为探讨NSCLC中PDGF-BB、Podoplanin的表达与淋巴管生成的关系,用免疫组化法,检测80例NSCLC和20例癌旁正常肺组织中PDGF-BB、Podoplanin的表达;计数LMVD,结合临床病理资料统计分析。结果PDGF-BB、Podo-planin在NSCLC中存在高表达（P〈0.05）;阳性表达组LM...     

慢性应激诱导的抑郁大鼠纹状体par-4基因的表达

为研究慢性温和应激诱导的抑郁大鼠纹状体内前列腺凋亡反应蛋白(prostate apoptosis response-4, par-4)的表达, 及甲基化是否参与par-4基因表达的调控, 将10周龄大鼠随机分为实验组和对照组, 实验组接受慢性温和应激, 对照组不接受实验性处理。于大鼠13周龄时, 采用强迫游泳、糖水偏爱测验测定大鼠的抑郁水平, 以实时定量PCR检测纹状体par-4及多巴胺D2受体(Dopamine receptor D2, DRD2) mRNA表达水平, 免疫印迹法检测纹状体par-4蛋白质表达水平, 用亚硫酸盐测序法检测par-4基因启动子区甲基化水平。结果发现, 与对照组大鼠相比, 实验组大鼠漂浮时间延长, 糖水偏爱率降低, 脑纹状体par-4、DRD2 mRNA及par-4蛋白质表达水平均降低, par-4基因启动子区甲基化水平两组差异不显著。提示慢性温和应激诱导大鼠产生了抑郁样行为, 并能抑制纹状体par-4基因的表达, 而基因甲基化可能并不参与其调控机制。     

PDGF-BB、Podoplanin在非小细胞肺癌中的表达与淋巴管生成的关系

为探讨NSCLC中PDGF-BB、Podoplanin的表达与淋巴管生成的关系,用免疫组化法,检测80例NSCLC和20例癌旁正常肺组织中PDGF-BB、Podoplanin的表达;计数LMVD,结合临床病理资料统计分析.结果PDGF-BB、Podo-planin"在NSCLC中存在高表达(P<0.05);阳性表达组LMVD较阴性表达组高(P均<0.05).因此,PDGF-BB、Podo-planin在NSCLC癌细胞上存在高表达,并且与肿瘤淋巴管的生成密切相关.     

Thy-1肿瘤标记物在肝癌的表达及意义研究

探讨Thy-1（又称CD90）表达与肝癌进展的关系。采用免疫组化法检测组织中Thy-1表达,流式细胞术检测外周血CD45^-CD90^＋细胞百分数。结果Thy-1在肝癌有不同程度表达,随病理级别和临床分期增高,表达也增多。故得出结论,Thy-1与肿瘤进展关系密切,检测Thy-1表达对肝癌的预后评估有实用价值。