慢性应激性抑郁发生中大鼠眶额叶多巴胺D1受体对谷氨酸及其NMDA受体的调节

本文旨在探讨慢性应激性抑郁发生过程中眶额叶多巴胺D1受体对谷氨酸(glutamic acid, Glu)及其N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受体的NR2B亚基的影响。实验通过建立慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁模型, 结合眶额叶微量注射多巴胺D1受体激动剂SKF38393和多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390, 运用糖水偏爱测试、悬尾实验和敞箱实验等方法检测动物的行为表现, 采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)和蛋白质免疫印迹法(Western blot, WB)来检测眶额叶内谷氨酸、多巴胺含量及NR2B和多巴胺D1受体的表达。结果显示, 与对照组相比, CUMS组大鼠表现出明显的抑郁样行为变化, 且眶额叶多巴胺含量降低, 其D1型受体表达降低, 谷氨酸含量升高, 其NMDA受体的NR2B亚基也明显上调; 注射SKF38393后可明显改善应激引起的抑郁样行为, 且眶额叶谷氨酸含量显著下降, NMDA受体的NR2B亚基表达也有所降低; 正常大鼠注射多巴胺D1受体拮抗剂SCH23390, 大鼠表现出和CUMS模型组相似的抑郁样行为, 且眶额叶谷氨酸含量升高, 其NMDA受体的NR2B亚基也明显上调。以上结果表明, 慢性不可预见性应激可能使眶额叶多巴胺释放减少, 从而使谷氨酸过量释放, NMDA受体过度激活, 导致抑郁发生。多巴胺抗抑郁作用是通过D1型受体抑制谷氨酸及其NMDA受体NR2B亚基表达来实现。     

应激性抑郁样行为发生中海马5-羟色胺1A受体的作用及其对NMDA受体和AMPA受体的调节

为探讨慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)诱发抑郁样行为发生中海马5-羟色胺1A受体(5-hydroxytryptamine receptor 1A, 5-HT1AR)表达与作用, 及其对谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受体和α-氨基羟甲基异恶唑丙酸(α-amino-3-hydroxy-5- methylisoxazole-4-propionic acid, AMPA)受体的影响。通过建立CUMS动物模型, 给应激抑郁模型大鼠海马微量注射5-HT1A受体激动剂、给正常大鼠海马微量注射5-HT1A受体拮抗剂, 测量大鼠体重变化率, 并采用糖水偏爱测试、旷场实验和悬尾实验等方法对大鼠进行行为学检测, 运用Western blot和ELISA方法检测大鼠海马组织中5-HT1AR和NMDAR和AMPAR的关键亚基的表达以及磷酸化水平。结果显示, 与对照组相比, CUMS组大鼠表现出抑郁样行为, 海马5-HT1AR、AMPA受体的GluR2/3亚基表达及磷酸化明显降低, NMDA受体的NR1和NR2B亚基表达及磷酸化显著增加; 正常大鼠海马微量注射5-HT1A受体拮抗剂WAY100635, 动物行为学表现及AMPA受体、NMDA受体表达及磷酸化水平均与CUMS组相同; 注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT能逆转应激诱导的上述改变。以上结果表明, CUMS诱发抑郁样行为与海马5-HT1AR表达下降, AMPAR表达量及磷酸化水平降低, NMDAR表达量及磷酸化水平升高有关。5-HT通过5-HT1AR产生抗抑郁作用。5-HT1AR激动剂抗抑郁作用与降低NMDAR表达量及磷酸化水平, 提高AMPAR表达量及磷酸化水平密切相关。     

海马NMDA受体经SP-NK1受体通路参与慢性应激诱发的抑郁样行为

为探讨海马N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid, NMDA)受体与P物质(Substance P, SP)及其神经激肽1 (neurokinin1, NK1)受体在慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS) 中的作用及其关系, 通过建立CUMS动物模型, 大鼠海马微量注射给药, 测量大鼠体重, 并采用糖水偏爱测试、旷场实验和悬尾实验等方法对大鼠进行行为学检测, 运用高效液相色谱(HPLC)法分析大鼠海马组织中SP和谷氨酸(glutamate, Glu)的含量变化。结果显示, CUMS诱发大鼠表现出明显的抑郁样行为, 海马组织中SP和Glu水平显著增加; 海马注射NMDA, 大鼠表现出与CUMS/SAL组相似的抑郁样行为, 且海马组织中SP的含量比正常对照组显著增加; 微量注射NK1受体阻断剂CP-96345和/或NMDA受体阻断剂MK-801后, 大鼠抑郁样行为明显改善, 且MK-801使CUMS导致的大鼠海马P物质水平升高得到明显控制, 而CP-96345没有明显改变CUMS引起的海马Glu水平升高; CP-96345使NMDA引起的抑郁样行为得到极显著改善。以上结果表明, 慢性应激引起大鼠海马Glu过量释放, 通过激活NMDA受体, 促进P物质合成释放增加, 激活NK1受体, 是导致抑郁样行为发生的重要途径之一。     

应激性抑郁样行为发生中眶额叶5-HT1A受体对谷氨酸和γ-氨基丁酸的调节

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)在抑郁症的发生及治疗中起着极其重要的作用,谷氨酸(glutamic acid,Glu)过度释放是应激性抑郁发生的重要原因。为了证明应激性抑郁样行为发生中眶额叶(orbitofrontal cortex,OFC)5-HT1A受体是否通过对Glu和γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric acid,GABA)的调节而发挥作用。本研究通过建立慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁模型,结合OFC区分别微量注射5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT和拮抗剂WAY100635,采用糖水偏爱率测试、旷场测试及悬尾测试检测动物的行为学表现,并通过高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)分别检测了OFC区5-HT、Glu和GABA的含量。结果显示,CUMS组和注射WAY100635组大鼠较对照组表现出明显的抑郁样行为,且Glu含量显著升高,但5-HT水平和GABA含量均未有显著性变化。微量注射8-OH-DPAT后,能够显著改善大鼠的抑郁样行为,且Glu显著降低,但5-HT水平和GABA含量仍未发生显著性变化。结果表明,慢性不可预见性温和应激所引起的抑郁样行为,并不是由于眶额叶5-HT水平的降低,而可能是由于5-HT不能满足应激状态下调节Glu能神经的需要,或可能是OFC区Glu能神经元上5-HT1A受体功能的降低,导致Glu水平过高所致。眶额叶5-HT1A受体在Glu合成与释放中发挥重要调节作用。     

早期剥夺所致大鼠抑郁样行为与海马BDNF mRNA表达变化

为探讨早期剥夺对大鼠行为与海马脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的影响,将新生的SD大鼠随机分为正常对照组与早期剥夺组,早期剥夺组在出生后1～14d每天孤养4h。监测体重,在出生后36?64天进行液体消耗试验,每周一次。12w龄时,进行穿梭箱试验,酶联免疫法检测海马BDNF含量,原位杂交法观察海马BDNF mRNA的表达。早期剥夺组大鼠体重显著低于正常对照组(p0.01),糖水摄入量与糖水偏爱显著低于正常对照组(p0.05或p0.01)。穿梭箱试验中,早期剥夺组大鼠在训练时的穿梭反应次数显著少于正常对照组(p0.05),在测试时,两组大鼠的被动逃避行为、主动逃避行为与逃避错误次数无显著差异。早期剥夺组大鼠海马BDNF含量、CA1区和CA3区BDNF mRNA表达显著低于正常对照组(p=0.05或p0.05)。提示早期剥夺可导致大鼠生长减慢,表现出快感缺失的抑郁样行为,但未诱导成年大鼠表现出明显的习得性无助倾向,早期剥夺能下调成年大鼠海马BDNFmRNA的表达。     

慢性应激对大鼠行为和免疫细胞热休克蛋白70表达的影响

目的：研究慢性不确定应激对大鼠急性整体热水浴后外周血和脾脏免疫细胞热休克蛋白70（Heat shock protein 70, HSP70）表达的影响。方法：随机将大鼠分成慢性应激组和控制组（每组14只）。通过4周的慢性不确定性应激诱发实验组大鼠明显的抑郁行为,此期间控制组大鼠正常饲养。随后给予大鼠42度整体热水浴刺激,维持直肠温度41度25min。热刺激后6h,采用流式细胞仪测定大鼠外周血和脾脏免疫细胞HSP70 水平。结果：与控制组大鼠相比,慢性应激大鼠在急性热刺激后HSP70合成明显减少。控制组大鼠的所有被检测的免疫细胞热应激后HSP70合成均明显增加。相反,慢性应激大鼠仅在外周血的单核细胞和粒细胞检测到HSP70合成增加,同时升高的水平明显低于控制组大鼠。结论：慢性应激降低大鼠免疫细胞HSP70的热诱导反应,提示HSP70保护性作用减弱可能参与了慢性应激损害免疫细胞功能的生物学过程     

慢性强迫游泳应激对大鼠情绪和脑细胞外信号调节激酶的影响

为探讨慢性强迫游泳应激对动物情绪和脑组织细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK1/2）的影响,动物情绪和脑组织ERK1/2之间的关系,将动物随机分为游泳应激组、装置对照组和控制组。分别对三组大鼠给予相应的干预14天, 然后进行行为观察,免疫印记法测定海马和前脑皮质ERK1/2水平。结果表明强迫游泳应激组和装置对照组都出现明显的情绪障碍。两组大鼠ERK1/2在前脑皮质的表达水平均显著升高,海马无显著变化。前脑皮质ERK2与糖精水摄入量呈显著负相关。提示慢性强迫游泳应激能够诱导大鼠的情绪障碍,提高ERK1/2在前脑皮质的表达水平,ERK1/2与情绪关系密切,可能是脑组织应激性情绪调节的重要生理机制。强迫游泳应激能够导致动物明显的抑郁反应,是比较理想的抑郁动物模型     

慢性应激损害大鼠学习记忆且抑制海马及额叶FGF2蛋白表达

慢性应激能够影响学习和记忆等认知功能。海马和额叶是与学习和记忆联系密切的脑区, 参与信息的获得、保持及提取。碱性成纤维生长因子(FGF2)对神经元发生、存活以及损伤修复具有重要促进作用, 目前成为神经系统退行性疾病相关研究的热点。本研究旨在探索慢性应激如何影响大鼠学习和记忆能力, 以及这一过程中FGF2蛋白在海马和额叶中表达的改变。实验中将16只雄性SD大鼠随机分为对照组和慢性应激组, 采用慢性不可预见温和刺激建立大鼠慢性应激模型, 通过Morris水迷宫实验及Y迷宫实验检测学习与记忆功能的改变, 并对海马及额叶中FGF2蛋白的表达情况进行Western blot及免疫组织化学检测。结果发现, 5周慢性应激导致大鼠学习和记忆能力受损, 海马及额叶FGF2蛋白表达下调。因此认为, FGF2蛋白可能参与慢性应激损害学习记忆能力的机制, 提示FGF2可能是诊断和治疗神经系统退行性病变的分子靶目标。     

脂多糖免疫激活对强迫游泳应激导致的抑郁样行为的影响

应激导致抑郁样行为的同时导致免疫激活敏感化, 但是免疫激活对应激导致的抑郁样行为的影响目前并不清楚。研究目的：利用脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)作为外周免疫激活启动剂, 强迫游泳应激(forced swim stress)作为应激模式, 考察免疫激活背景是否影响应激导致的抑郁样行为。方法：42只SD雄性大鼠随机分为四组：LS组(LPS + swim, n=12), LC组(LPS +空白, n=10), AS组(生理盐水+swim, n=10), AC组(生理盐水+空白, n=10)。在实验期第一天根据分组分别注射脂多糖(LPS, 50 μg/kg, 腹腔注射)或生理盐水一次, LS组和AS组大鼠于注射后2小时进行第一次游泳应激, 此后持续应激2周。分别在应激一次后, 应激2周, 应激结束后1周和应激结束后2周测定大鼠的糖精水偏爱、旷场行为和高架十字迷宫行为。结果显示：应激一次后, 应激2周, 应激后1周LS组大鼠与AC组相比较, 糖精水偏爱分数, 旷场中的水平活动显著下降; 应激2周, AS组大鼠相对于AC组大鼠的糖精水偏爱分数以及旷场中的水平活动都显著下降, 结论：慢性强迫性游泳应激导致抑郁样行为, 应激前LPS免疫激活能够促使应激导致的抑郁样行为更容易出现, 症状加剧, 并持续较长的时间。     

启动子区甲基化导致ZNF331在结直肠癌中表达缺失

通过分析锌指蛋白331 (ZNF331)在结直肠癌中的甲基化及表达情况,探讨ZNF331基因的甲基化与结直肠癌的关系,为结直肠癌的早期诊断和治疗提供新的靶点.采用甲基化特异性PCR(MSP)检测7株结直肠癌细胞系和66例结直肠癌组织标本中ZNF331基因启动子区的甲基化情况.结果7株结直肠癌细胞系中LOVO、RKO、DLD1和HCT116启动子区完全甲基化,SW620和HT29呈部分甲基化,SW480为非甲基化.LOVO、RKO、DLD1、HCT116细胞系中ZNF331mRNA不表达,经5-Aza处理后恢复表达.在SW480、SW620、HT29细胞系中,5-Aza处理前后均表达,处理后表达量增加.在66例结直肠癌组织中,ZNF331启动子区甲基化率为72.7％(48/66),而正常结直肠组织中无甲基化(0/7).     

慢性应激诱导的抑郁小鼠神经肽Y的表达及抗抑郁药的作用

神经肽Y是一个多肽,广泛分布于周围和中枢神经系统,以下丘脑的浓度为高,参与机体神经内分泌、情绪、行为等的调节。 为探讨慢性应激诱导的抑郁模型小鼠脑内神经肽Y (NPY)的表达,以及抗抑郁药的作用机理,采用慢性应激与孤养方法,建立抑郁小鼠模型。用旷场行为 (Open-Field)法,观察模型组与正常对照组行为学改变方面的差异。将36 只抑郁模型小鼠随机分成盐酸氟西汀组、盐酸阿米替林组、生理盐水治疗组,并与12 只正常对照组比较。用半定量逆转录－聚合酶联反应(RT－PCR) 法、细胞酶联免疫法及蛋白免疫印迹(Western－blot) 法、免疫组织化学法,比较四组小鼠下丘脑NPY 的表达。结果表明：(1)与正常组比较,抑郁模型组小鼠活动总路程与活动次数减少（p< 0.01）,体重增速下降（p< 0.05）。（2）与正常组比较,抑郁模型组小鼠下丘脑NPY 的mRNA 表达下降（p< 0.01）;经盐酸氟西汀、盐酸阿米替林治疗后,下丘脑NPY 的mRNA 及蛋白表达增高,与生理盐水组比较差异显著（p< 0.01）。(3) 与正常组比较,生理盐水治疗组胞膜和胞质呈棕黄色染色,显示出明显的免疫组化阳性反应;经盐酸氟西汀、盐酸阿米替林治疗后,胞膜和胞质的着色与背景色接近,免疫组化呈弱阳性、阴性反应。提示抑郁模型组小鼠脑内NPY 表达水平有显著下降,使用抗抑郁药有利于提高脑内NPY 的mRNA 及蛋白表达,可能是此类药物产生抗抑郁效应的机制之一。     

慢性束缚应激对大鼠脑内Fas、FasL含量的影响

为探讨慢性束缚应激对大鼠脑内不同部位Fas/FasL系统表达的不同影响。将24只雄性SD大鼠随机分为束缚应激组、装置对照组和正常对照组（n=8）。分别对三组大鼠给予相应的干预14天,用Western-blotting方法测定应激后大鼠大脑前脑皮质、内嗅皮质以及海马区域Fas、FasL蛋白含量。结果表明,应激后各脑区三组大鼠Fas含量差异具有统计学意义（p < 0.01）,束缚应激组明显高于正常对照组或装置对照组（p < 0.01）。在海马区域,三组大鼠FasL含量差异具有统计学意义（p < 0.01）,束缚应激组大鼠FasL蛋白水平显著高于正常对照组或装置对照组(p < 0.01)。三组大鼠自身大脑前脑皮质、内嗅皮质以及海马Fas含量的差异比较均无统计学意义( p > 0.05) 。束缚应激组大鼠海马的FasL含量高于前脑皮质和内嗅皮质(p < 0.05);正常对照组或装置对照组自身不同脑区间FasL含量的变化无统计学意义。提示慢性束缚应激能诱导大鼠脑内Fas/FasL系统表达水平的改变,对不同的脑区,其影响程度明显不同     

多巴胺相关基因甲基化、家庭环境与创造力的关系

“遗传与环境”的争论一直是创造力研究的核心问题, 但目前对于环境以及遗传与环境交互作用对创造力影响的分子生物机制还未有研究涉及。近年来, 随着表观遗传学的兴起, 揭示影响心理行为的表观遗传机制现已成为心理学研究的热点。作为环境与基因组之间的纽带, 表观遗传学研究为揭示环境以及遗传与环境交互作用对创造力影响的分子生物机制提供了机遇。本研究以多巴胺相关基因、家庭环境以及两者对于创造力的交互作用为切入点, 对影响创造力的表观遗传机制进行考察, 并在此基础之上, 对环境以及遗传与环境交互作用对创造力影响的分子生物机制进行探索。具体研究内容包括：(1)通过对多巴胺相关基因甲基化模式与创造力关系的系统考察, 筛选出甲基化模式与创造力有关的基因; (2)对筛选出的基因, 进一步考察其甲基化模式在家庭环境及其遗传多态性与家庭环境交互作用对创造力影响中的中介作用。本研究有助于揭示创造力的表观遗传机制, 深化关于遗传与环境对创造力影响的作用机制的理解。     

自尊对主观幸福感的影响：有调节的中介效应

采用问卷法调查了1084名高一至大四的学生,探讨了自尊、主观幸福感、自我怀疑及抑郁的关系。结果发现：自尊在自我怀疑与主观幸福感之间起部分中介作用,这一中介作用的实现受到抑郁的调节,即自尊对主观幸福感的影响是有调节的中介效应。     

后疫情时代：复工阶段不同阶层的社会情绪及压力因素

本研究考察新冠肺炎疫情复工阶段,不同阶层社会情绪和压力因素随时间的变化规律。基于三次问卷调查（NT1 = 1073; NT1 = 983; NT3 =1078）发现：（1）民众社会情绪均表现为积极情绪高于消极情绪,而且随时间推进社会情绪持续向好;（2）低阶层者的社会情绪始终比高阶层者更消极;（3）民众感知的安全压力随时间下降,而经济压力随时间没有显著变化;（4）低阶层者感知到更大的经济压力,高阶层者感知到更大的安全压力;（5）安全压力在社会阶层与积极情绪和消极情绪之间起显著的中介作用,经济压力在社会阶层与消极情绪之间起显著的中介作用。研究揭示了不同社会阶层在复工阶段存在社会情绪和压力来源的差异,为有针对性进行积极社会心态治理提供启示。     

慢性应激对大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路活性的影响

探讨慢性应激对大鼠海马Akt/FKHRL1信号通路活性的影响,及其应激源特异性。将24只雄性SD大鼠随机分为心理应激组、束缚应激组和正常对照组（n=8）。用Western-blotting方法测定28天应激后海马Akt、FKHRL1蛋白含量及其磷酸化水平。结果表明,应激后三组大鼠海马磷酸化Akt、FKHRL1含量差异有统计学意义（p < 0.01;p < 0.001）,束缚应激组低于正常对照组（p < 0.01）。提示慢性应激能导致海马磷酸化Akt、FKHRL1表达水平降低,但其影响程度与应激源特异性有关     

Gender differences in acute and chronic stress in Wistar Kyoto (WKY) rats.

While females are considered more susceptible to depressive behavior, this assertion is not strongly supported by the experimental literature. Since stress contributes to depressive behavior, male and female Wistar Kyoto (WKY) rats were exposed to either one session (acute stress) or 5 sessions (chronic stress) of restraint plus cold in order to study depressive behavior in male and female rats. After their respective treatment exposure, rats were tested in the open field test (OFT) and for retention of a passive-avoidance (P-A) task. One stress session resulted in significant immobility in the OFT for males, whereas 5 sessions were required to produce similar immobility in female rats. Acute stress interfered with the retention of the P-A response for males, while both acute and chronic stress produced poor P-A responses in female rats. Food consumption decreased progressively, as a function of stress sessions, in female rats, whereas feeding in males returned to control levels after five stress days. Both acute and chronic stress exacerbated the stress ulcer response in male rats, but not in female rats. Chronic, but not acute, stress resulted in an increase in serotonin transporter mRNA levels in the dorsal raphe nucleus of both male and female rats. The general consensus from these data suggested that female rats were more vulnerable to chronic stress and consequently supported the notion that females may be more susceptible to stress-induced behavioral depression. Key Words: WKY rats, acute and chronic stress, gender, passive avoidance, open field behavior, stress-ulcer, adrenal weight, serotonin, dorsal raphe nucleus